By this author

C-Terminal Domain of Bacillus cereus Hemolysin II is Capable of Forming Homo- and Hetero-Oligomeric Forms of Toxin on the Membrane Surface

Issue number 4 from 12.02.2025

Гемолизин II (НlyII) – один из ключевых патогенных факторов условно-патогенной грамположительной бактерии Bacillus cereus. НlyII, образуя поры на мембранах, лизирует клетки-мишени. НlyII относят к группе β-пороформирующих токсинов. Отличительная особенность НlyII – наличие C-концевого домена из 94 а.о. (НlyIICTD). Показано, что в слабокислых условиях (pH 5.0), соответствующих примембранной области, C-концевые домены (как сами по себе, так и в составе токсина) образуют устойчивые комплексы, состоящие из полиоразмерных и укороченных молекул токсина. НlyII, НlyIILCTD (большой C-концевой фрагмент Met225–Ile412) и НlyIICTD получали с использованием рекомбинантных штаммов-продуцентов Escherichia coli BL21(DE3). Биотинилирование НlyIICTD проводили с использованием N-гидроксисукцинимидного эфира биотина. Взаимодействие НlyIICTD с НlyIICTD, НlyIILCTD и НlyII, а также взаимодействие НlyIICTD с мембранами эритроцитов исследовали иммуноферментным анализом и иммунобиоттингом, как с использованием стрептавидина, конъюгированного с пероксидазой хрена, так и с использованием моноклональных антител против НlyII. НlyIICTD в слабокислых условиях взаимодействовал как с доменом НlyIICTD в составе полиоразмерного токсина, так и с белком НlyIICTD. Взаимодействие НlyIICTD с мембраной эритроцитов кратно увеличивалось в присутствии токсина.

14 0