Изучены свойства потенциал-зависимого калиевого канала Kv1.1, сформированного в клетках Neuro-2a из димеров α-субъединиц Kv1.1 человека, соединенных дипептидом Lys-Leu и слитых по N-концу с флуоресцентным белком mKate2 (mKate2-(Kv1.1)). Установлено, что объединение α-субъединиц Kv1.1 в димер не повлияло на уровень мембранной экспрессии канала и характер его клеточного распределения по сравнению с мономерами mKate2-Kv1.1. Для каналов на основе димеров mKate2-(Kv1.1) и мономеров mKate2-Kv1.1 не выявлено отличий в потенциале полуактивации, константах активации канала, величинах и характере токов ионов калия. Полученные данные указывают на возможность создания аналогичным способом биоинженерных белковых конструкций, объединяющих две разные α-субъединицы, которые обеспечат в клетках млекопитающих формирование флуоресцирующих гетеротетрамерных потенциал-зависимых калиевых каналов со стехиометрией α-субъединиц 2 : 2.
Антиген PRAME (Preferentially expressed Antigen in Melanoma), относящийся к группе раковотестикулярных антигенов и экспрессирующийся в различных типах опухолей, представляет собой привлекательную мишень для направленной терапии онкологических заболеваний. В данной работе на основе моноклонального антитела 6Н8 к белку PRAME было получено гуманизированное антитело 6Н8Нu, которое было наработано в клетках CHO. Было показано, что гуманизированное антитело сохраняет высокую аффинность родительского мАТ по отношению к антигену (1.2 нМ), связывается как с рекомбинантным, так и с нативным белком PRAME, оказывает ингибирующее действие на пролиферацию PRAME+ клеточной линий меланомы человека Mel Ibr, а также ингибирует рост опухолевых узлов в степени, сравнимой с действием мышиного антитела 6Н8 и цитостатика мелфалана.
Впервые проведен анализ белков мембранной фракции психротрофной бактерии методом безметочной количественной хромато-масс-спектрометрии. При сравнении образцов из клеток, культивировавшихся при 10°С и при комнатной температуре, обнаружены существенные отличия в содержании многих белков, осуществляющих важнейшие физиологические процессы, включая ДНК- и РНК-связывающие белки, мембранные транспортеры, белки, обеспечивающие защиту от осмотического и окислительного стресса, и др. Результаты работы позволяют уточнить механизмы процессов, протекающих в мембранах клеток психротрофных бактерий при низких температурах, и дополняют существующие представления о стратегиях адаптации микроорганизмов, обитающих в многолетнемерзлых отложениях. Полученные данные также могут быть использованы для поиска потенциальных биокатализаторов, обладающих активностью при низких температурах.
Индексирование
Scopus
Crossref
Высшая аттестационная комиссия
При Министерстве образования и науки Российской Федерации