Изучены свойства потенциал-зависимого калиевого канала Kv1.1, сформированного в клетках Neuro-2a из димеров α-субъединиц Kv1.1 человека, соединенных дипептидом Lys-Leu и слитых по N-концу с флуоресцентным белком mKate2 (mKate2-(Kv1.1)). Установлено, что объединение α-субъединиц Kv1.1 в димер не повлияло на уровень мембранной экспрессии канала и характер его клеточного распределения по сравнению с мономерами mKate2-Kv1.1. Для каналов на основе димеров mKate2-(Kv1.1) и мономеров mKate2-Kv1.1 не выявлено отличий в потенциале полуактивации, константах активации канала, величинах и характере токов ионов калия. Полученные данные указывают на возможность создания аналогичным способом биоинженерных белковых конструкций, объединяющих две разные α-субъединицы, которые обеспечат в клетках млекопитающих формирование флуоресцирующих гетеротетрамерных потенциал-зависимых калиевых каналов со стехиометрией α-субъединиц 2 : 2.
Антиген PRAME (Preferentially expressed Antigen in Melanoma), относящийся к группе раковотестикулярных антигенов и экспрессирующийся в различных типах опухолей, представляет собой привлекательную мишень для направленной терапии онкологических заболеваний. В данной работе на основе моноклонального антитела 6Н8 к белку PRAME было получено гуманизированное антитело 6Н8Нu, которое было наработано в клетках CHO. Было показано, что гуманизированное антитело сохраняет высокую аффинность родительского мАТ по отношению к антигену (1.2 нМ), связывается как с рекомбинантным, так и с нативным белком PRAME, оказывает ингибирующее действие на пролиферацию PRAME+ клеточной линий меланомы человека Mel Ibr, а также ингибирует рост опухолевых узлов в степени, сравнимой с действием мышиного антитела 6Н8 и цитостатика мелфалана.
Впервые проведен анализ белков мембранной фракции психротрофной бактерии методом безметочной количественной хромато-масс-спектрометрии. При сравнении образцов из клеток, культивировавшихся при 10°С и при комнатной температуре, обнаружены существенные отличия в содержании многих белков, осуществляющих важнейшие физиологические процессы, включая ДНК- и РНК-связывающие белки, мембранные транспортеры, белки, обеспечивающие защиту от осмотического и окислительного стресса, и др. Результаты работы позволяют уточнить механизмы процессов, протекающих в мембранах клеток психротрофных бактерий при низких температурах, и дополняют существующие представления о стратегиях адаптации микроорганизмов, обитающих в многолетнемерзлых отложениях. Полученные данные также могут быть использованы для поиска потенциальных биокатализаторов, обладающих активностью при низких температурах.
Индексирование
Scopus
Crossref
Higher Attestation Commission
At the Ministry of Education and Science of the Russian Federation